微粒子計數器

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病理組織代工服務

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免疫組織化學染色試劑

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快篩試劑委託研究服務

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標準微粒子試劑

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Masson’s Trichrome Stain


Masson’s Trichrome Stain (Connective Tissue Stain) TASS01

Masson’s 三色染色(結締組織染色)

 

一、原理介紹:

Masson三色染色法,是最傳統的膠原纖維 Collagen fiber染色技術,主要用於膠原纖維與肌肉纖維的鑑別染色。

 

Masson三色染色法利用陰離子染料分子的大小和組織間的滲透差異,先以小分子且可抵抗酸性及溶液脫色的

Weigert’s Hematoxyline進入結構致密、滲透性低的細胞核內;隨後以Biebrich Scarlet-Acid Fuchsin可染色嗜酸性組織

Acidophilic tissue(肌肉纖維Muscle fiber、細胞質Cytoplasm、角質Keratin etc.);最後以Aniline blue染色,其分子最大只能

進入結構疏鬆、滲透性高的結締組織(膠原纖維)。

 

二、染色目標:

膠原纖維Collagen fiber(藍色)

肌肉纖維Muscle fiber(紅色)

 

三、染色應用:

Masson三色染色法,主要染色標的膠原纖維Collagen fiber,故常被用於腎臟、肺臟與肝臟等組織的纖維化判定依據與

投藥改善的評估方式之一。(ex:肌營養不良症 Muscular dystrophy、心肌梗塞 Myocardial infarction、肝硬化 Cirrhosis、

腎絲球纖維化 Glomerular fiborsis、肝及腎之腫瘤等發生纖維化疾病等)。

 

 四、呈色結果:

黑色-細胞核Nucleus

紅色-肌肉纖維Muscle fiber、細胞質Cytoplasm、角質Keratin etc.

藍色-膠原纖維Collagen fiber

 

五、BioTnA Masson’s Trichrome Stain TASS01 染色步驟 Protocol

1.烤片 65℃,60分鐘或37℃,overnight。

2.脫蠟,Xylene*2,各10分鐘。(或Xylene*3,各7分鐘)

3.覆水,99.9(100)%*2,95%*1,85%*1,75*1,各2分鐘。

4.自來水浸泡約5分鐘。

5.Bouin’s solution固定以56C浸泡 1小時

6.Weigert’s Hematoxylin染色8分鐘。

7.自來水沖洗10分鐘(避免直沖組織),轉色。

8. Biebrich Scarlet-Acid Fushsin染色10分鐘。

9. Phosphomolybdic acid-phosphotungstic aicd 分色10分鐘。

(使Biebrich Scarlet-Acid Fushsin從膠原蛋白中擴散出來,同時使肌肉呈紅色。)

10. Aniline blue 3min 染色3分鐘。

11. 1% Acetic acid 分色15秒。

12. 玻片以風冷晾乾

13.Xylene膠封片(尚未封片前,須先置入xylene中。若使用Xylene取代劑時須注意封片膠與取代劑是否可互溶)。

※備註:請勿以酒精脫水,會把染好的顏色洗掉。

 

六、BioTnA Masson’s Trichrome Stain TASS01 實際染色參考:

圖一、豬的結腸Colon,黑色為細胞核Nucleus;紅色為肌肉纖維Muscle fiber 、細胞質Cytoplasm、角質Keratin etc.;藍色為膠原纖維Collagen fiber。

 

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