微粒子計數器

美國TSI AEROTRAK™微粒子計數器,符合ISO 21501-4的嚴格規定。 這些粒子計數器採用PSLs校正,追溯NIST,是公認的標準粒子測量。

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免疫組織化學染色試劑

有效解決non-specific binding造成的Background。
可用於2種物種來源相同的抗體進行染色。
經濟實惠,且可避免Ms on Ms,Rb on Rb 干擾。

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組織包埋、切片、染色、判讀掃片

應用於藥物開發、健康食品功能性,或研究單位探討疾病時透過不同動物模型加以實驗評估;對實驗動物全身組織器官全面性檢查或細部分析,以瞭解藥物與食品的毒性或功效。

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智能鞋底清潔機

※獨家具有彩色螢幕,觸控面板,可程序化控制自動或手動進出水。※並且多重感應器,可偵測及顯示內部維修保養訊息。工廠通過ISO9001、ISO4001、ISO13485、ISO17025等國際認證。

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免疫組織化學染色原理與步驟(immunohistochemistry, IHC)


 

 

Immunohistochemistry staining Kit , IHC ( for Protein )
免疫病理化學染色 ( 針對蛋白質 )

一、原理介紹
 Immunohistochemistry , IHC為具有專一性之呈色,藉由組織上蛋白質的抗原表位Epitope與
抗體Antibody進行非共價鍵結合Non-covalent bonding (ex:凡德瓦爾利Van der Waals forces、
氫鍵hydrogen bonds、靜電作用electrostatic interactions),以偵測組織或細胞內目標蛋白質的
表現量及位置。

(一)、固定與切片 Fixation & Section
組織切片前多以10% 福馬林固定Formalin fixation維持蛋白質型態,切片後會貼於有poly-L-lysine
塗層之玻片上烤片,使組織固定在玻片上。

(二)、過氧化氫處理 Hydrogen peroxide
 組織內含有超氧化物歧酶Superoxide Dismutase ,SOD,尤其腦、肝、血液等含量特別高,
因此若使用可見光呈色劑Chromogen作呈色時(DAB、AEC、HRP Green),需經過3% H2O2處理,
使SOD破壞,減少Polymer HRP呈色的背景Background。

(三)、抗原修復 Retrieval
 福馬林固定石蠟包埋Formalin Fixation Paraffin Embedded ,FFPE中,由於甲醛的化學特性,
能使不帶電荷的氨基酸間以亞甲基橋Methylene bridge(-CH2-)的方式形成交聯Cross-links。
(Lys, Tyr, Trp, Cys, His, Arg, Asn, Gln)但Cross-links會導致肽Peptides及Epitopes的抗原性
Antigenicity降低,因此透過抗原修復Retrieval來回復與Antibody bidding的能力。

(四)、阻斷劑 Blocking
 組織切片經過適當的Retrieval後,為了減少抗體對於組織的非專一性結合non-specific bidding
產生,會使用BioTnA特別對於IHC優化的非血清性Non-rerum Immunoblocking reagent,
可有效降低背景Background的產生。

(五)、抗體結合與沉澱 Antibody bidding & Precipitate
 組織切片經過適當的Retrieval後,使Methylene bridge打斷,便可使一級抗體Primary antibody
與Epitope達到良好的bidding,主要利用抗體上的抗原結合區段Fragment antigen binding ,Fab
可以有效的辨識Antigen上的Epitope進行專一性結合。
 隨後以二級抗體Secondary antibody(Polymer HRP)來連接Primary antibody的抗原結晶區
Fragment crystallizable region ,Fc端,因具有辣根過氧化物酶Horseradish Peroxidase,
可使Chromogen氧化後沉澱Precipitate,將被bidding的Epitopes呈陽性反應Positive。

IHC 原理二、染色目標與應用:

    由於IHC涉及特異性抗原-抗體反應,與僅能以有限的蛋白質、酵素和組織結構進行識別的
傳統特殊酶染色技術相比,IHC具有明顯的優勢。因此IHC已成為一項至關重要的技術,
並已在許多醫學研究實驗室以及臨床診斷中廣泛使用,如癌症的預後標記Prognostic Markers
in Cancer、組織內未知腫瘤Tumors of Uncertain Histogenesis、發育與凋亡Development
and Apoptosis、神經性退化疾​​病Neurodegenerative Disorders、腦外傷Brain Trauma、
肌肉中疾病Muscle Diseases 等etc.
 IHC可見光染色可分為單色染色Single stain、雙色染色Double stain、三色染色Triple stain
三種染色方法,其染色原理均相似,主要取決為預觀察之目標及期望的表現形式,透過Antibody

bidding的位置以及使用的Chromogen來呈現其結果,
下列表格將簡單整理BioTnA各式染色之Kit組。

BioTnA IHC reagnt

三、呈色結果:

►細胞核Nucleus-藍色Hematoxylin 或 紅色 Fast Red
►陽性反應Positive-棕色DAB、紅色AEC、綠色HRP Green 或藍色Alk Blue

四、Immunohistochemistry,IHC 實際染色參考:

Attachments Figure A

 Stiff matrix–up-regulated Klf5 accompanied with cell proliferation mainly occurs in renal tubular cells

but not in renal endothelial cells or fibroblasts.

 

A and B: Representative images show IHC double staining with anti-Klf5 (green) and anti-PCNA

 (brown, a marker of cell proliferation) antibodies of kidney sections from sham (operated control),

 UUO, or UUO + BAPN .

C and D: Representative images show IHC double staining with anti-Klf5 (green) and anti-AQP1

 [brown, a marker of PT (asterisks)] antibodies of kidney sections from Sham (operated control),

 UUO, or UUO + BAPN.

E: Representative images show IHC double staining with anti-Klf5 (green) and CD31(brown,

 a marker of endothelium) of kidney sections from sham and UUO mice.

 
 
 

五、Immunohistochemistry staining Kit 染色步驟(Protocol)

 

 

六、Refenece

 

BioTnA Immunohistochemistry (IHC) Single stain kit

►Positive effects of cell-free porous PLGA implants and early loading exercise on hyaline cartilage regeneration in rabbits
►Protective effects of the roots of Angelica sinensis on strenuous exercise-induced sports anemia in rats
►Activation of GLP-1 Receptor Enhances Neuronal Base Excision Repair via PI3K-AKT-Induced Expression of Apurinic/Apyrimidinic Endonuclease 1
►Impact of Histone H1 on the Progression of Allergic Rhinitis and Its Suppression by Neutralizing Antibody in Mice
►Can Early Rehabilitation Prevent Posttraumatic Osteoarthritis in the Patellofemoral Joint after Anterior Cruciate Ligament Rupture? Understanding the Pathological Features
►Positive effects of cell-free porous PLGA implants and early loading exercise on hyaline cartilage regeneration in rabbits
►Improving immunological tumor microenvironment using electro-hyperthermia followed by dendritic cell immunotherapy
►Macrophage migration inhibitory factor has a permissive role in concanavalin A-induced cell death of human hepatoma cells through autophagy
►Water Extract and Its Bioactive Components Ameliorate Dermal Damage in UVB-Irradiated Skin Models
 

BioTnA Immunohistochemistry (IHC) Double stain Kit

►Matrix-StiffnesseRegulated Inverse Expression of Kruppel-Like Factor 5 and Kruppel-Like Factor 4 in the Pathogenesis of Renal Fibrosis  Attachments: A B C D
►Expression of Helios in gastric tumor cells predicts better survival in gastric cancer patients
►Matrix-StiffnesseRegulated Inverse Expression of Krüppel-Like Factor 5 and Krüppel-Like Factor 4 in the Pathogenesis of Renal Fibrosis

 

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